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    注意,藥敏試驗方法評價消毒劑不科學!

    來源:     閱讀次數:5     發布時間:2022-07-25

    消毒劑抗菌包括殺菌和抑菌。


    消毒劑殺菌評價是指檢驗和評價各種消毒劑殺滅或清除傳播媒介上的微生物效果的試驗,要求參照《消毒劑實驗室殺菌效果檢驗方法》(GB/T 38502-2020)標準。


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    圖1.懸液法-平板計數(左:消毒劑未作用 右:消毒劑作用)


    消毒劑抑菌評價是指利用抑菌產品體外抑制細菌或真菌生長效力的試驗。參照《消毒技術規范》(2002年版),適用于各種抑菌消毒劑產品實驗室抑菌效果的測定。


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    圖2.抑菌環法(左:消毒劑未作用 右:消毒劑作用)


    抗菌藥物敏感試驗(簡稱藥敏試驗)是指對所分離的細菌進行體外抗菌藥物的敏感性試驗。旨在了解病原微生物對各種抗菌藥物(如抗生素)的敏感(或耐受)程度,對指導臨床的科學、準確、及時用藥,避免疾病的暴發性流行、藥物殘留及微生物耐藥性的增加起著關鍵性地作用。


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    圖3.E-test法


    表1 試驗類型對比

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    不同適用對象

    針對不同類型消毒劑產品實驗室殺菌/抑菌測定方法不一致。懸液定量法適用范圍較廣,大多數消毒劑均適用,如:季銨鹽類、碘類、戊二醛及其復方消毒劑等;載體定量法多用于檸檬酸消毒劑等。


    抑菌環法(圖2)僅適用于抑菌劑和溶出性抑菌產品鑒定;瓊脂稀釋法適用于不溶性抑菌產品;營養肉湯稀釋法適用于可溶性抑菌產品;滯留抑菌效果測定試驗適用于抑菌香皂和沐浴露;洗衣粉抗菌效果測定試驗適用于抑菌洗衣粉(劑)、振蕩燒瓶試驗適用于非溶出性抑菌織物鑒定;浸漬試驗適用于溶出性抗菌織物檢測;奎因試驗適用于非溶出性硬質表面抑菌產品鑒定。


    不同作用機理

    藥敏試驗的不同方法無特定藥物適用范圍。常用方法有:擴散法(Bauer test)、稀釋法(dilution test)、E-test法(圖3)。然而實際操作中,不同抗菌藥物敏感性試驗方法靈敏度有較大差異。目前尚無資料對藥敏試驗中不同試驗方法的靈敏度進行選擇比較,且很多藥品難溶于水,這都為抗菌藥物敏感性試驗的操作及分析帶來了許多不確定因素。


    消毒劑的抗菌(含殺菌和抑菌)作用原理是通過以下幾種途徑與發生接觸的細菌作用,從而達到抑制細菌生長進而殺菌的效果。1)金屬離子接觸反應。當帶正電荷的金屬離子與帶負電荷的生物膜接觸時,與蛋白質上巰基、氨基等發生反應,破壞細胞合成酶的活動中心結構,造成微生物死亡或喪失分裂增殖能力。2)有些微量元素能催化活動中心,它們能氧化或使細菌細胞中蛋白質、不飽和脂肪酸、糖苷等發生反應,破壞其正常結構,從而使其死亡或喪失增殖能力。3)細菌在電場引力作用下,細胞壁、細胞膜上負電荷分布不均勻造成物理性破裂,發生“溶菌”現象。4)損壞細胞內容物、酶、蛋白質、核酸。


    藥敏試驗中,抗菌藥物對細菌的作用機制是:1)干擾細胞壁合成,如磷霉素、環絲氨酸、萬古霉素、青霉素等。2)損傷細菌生物膜。3)抑制細菌蛋白質的合成。4)影響核酸和葉酸代謝,從而影響和終止細菌的生長繁殖。


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    不同應用場景

    消毒劑殺菌/抑菌試驗主要用于消毒劑鑒定和日常監測,用來評價消毒劑對環境、物體表面、手、皮膚、醫療器械等微生物的殺滅/抑制效果。


    藥敏試驗主要用于鑒定某些細菌篩選臨床效果最佳的感染性疾病的治療藥物。


    藥敏試驗的局限性

    1、在限制性培養條件下,生命周期對于菌群是不確定性的,即增殖細菌群體的組成(細胞大小、基因表達、生理特性等)都不是同質和均衡的。而菌群的異質性對藥敏試驗的影響未能得到表達。如慶大霉素,菌群在恒速生長期和衰亡期的藥物敏感性增強,菌群內異質性增加,減速生長期藥物敏感性減弱,菌群內異質性減少。


    2、使用抗生素,菌群的生理異質性和抗藥性會引起MIC提高。對微生物來說,抗藥性是相對的,沒有固定的藥物系列梯度濃度對微生物生長抑制的“敏感”或“抗藥”分界點,因此人為區分“敏感”和“抗藥”使得臨床用藥面臨一定困難。


    綜上,消毒劑產品和抗菌藥物由于其應用場景不一致,且試驗方法的適用對象、作用機制明顯有差異,加之藥敏試驗有一定的局限性,因此,若使用藥敏試驗的方法和標準衡量消毒劑作用效果是不準確的,反之亦然。


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